Semaglutid-Verunreinigungen

Semaglutid-Verunreinigungen|Simeglutid-Verunreinigungskontrolle|Kundenspezifische Synthese und Strukturbestätigung von Verunreinigungen|Wissenschaft-Peptid

Soma Lutide (Simeglutide) Verunreinigungskontrolle - für GLP-1 Arzneimittelqualitätsstudie, Einreichung von Generika.Science-Peptid bietet kundenspezifische Synthese von Soma Lutide-bedingten Verunreinigungen, einschließlich fehlender Peptide, oxidierter Verunreinigungen, Fettsäure-Peeling-Produkte, PEG-Ketten-bedingter Verunreinigungen usw., begleitet von strukturellen Bestätigungsdaten. Wir können Sie bei Ihrer Verunreinigungsprofilforschung unterstützen. Nehmen Sie gerne Kontakt mit uns auf.

Semaglutid (auch bekannt als Semaglutid) ist in diesen Jahren in aller Munde. Novo Nordisk verlässt sich darauf, den Marktwert auf den weltweit zweitgrößten, inländischen Hersteller von Peptid-Generika zu steigern, fast nein, starrt darauf. Orale Darreichungsformen und injizierbare Darreichungsformen sind allesamt große Märkte. Wer kann nach Ablauf des Patents als Erster die Qualitätsforschung betreiben, wer hat die Möglichkeit, sich das erste Generikum zu sichern?

 

Allerdings ist die Qualitätsstudie von Somatostatin, ehrlich gesagt, schwieriger als die vieler Peptide. Es ist ein 31--Peptid mit einer Fettsäurekette (Octadecandisäure) und einem PEG-Linker. Diese Struktur bestimmt, dass das Verunreinigungsspektrum besonders reichhaltig ist. - Fehlende Peptide, oxidierte Verunreinigungen, Fettsäureabspaltungsprodukte, PEG-kettenbedingte Verunreinigungen und Dimere müssen jeweils eine Kontrolle haben und klar sein. Besonders die PEG-Kette, die in gewöhnlichen Peptiden nicht vorkommt, ist einzigartig bei Somalutide.

 

Wir haben viel Erfahrung in der Synthese komplexer Peptidverunreinigungen gesammelt. Wir haben uns auf die Untersuchung von Somatostatin spezialisiert und wissen, welche Schwierigkeiten es bei seinem Verunreinigungsprofil gibt und welche wesentlichen Kontrollelemente es gibt. Wir können die Synthese verschiedener Semaglutid-Verunreinigungskontrollen entsprechend Ihren Anforderungen mit strukturellen Bestätigungsdaten anpassen und Ihnen bei der Festlegung der Methode helfen, sodass die Wahrscheinlichkeit, dass Ihnen bei der Einreichung ein Nachtrag ausgestellt wird, geringer ist.

Die molekulare Struktur von Somatostatin bestimmt, dass sein Verunreinigungsprofil viel komplexer ist als das gewöhnlicher Peptide. Wenn wir Verunreinigungsstudien durchführen, konzentrieren wir uns hauptsächlich auf diese Kategorien:

Fehlendes Peptid
Die 31 Aminosäuren, von denen jede bei der Synthese fehlt, sind eine Verunreinigung. Die Retentionszeiten der fehlenden Peptide bei HPLC waren weit verteilt, mit unterschiedlicher Polarität der fehlenden Peptide an verschiedenen Positionen. Einige fehlen am N--Terminus, einige in der Mitte und einige in der Nähe der Bindungsstelle der Fettsäure. Wir haben einen Auftrag von einem Kunden erhalten, der etwa ein Dutzend fehlende Peptide an verschiedenen Positionen anforderte, um alle möglichen fehlenden Verunreinigungen in seinem Prozess zu lokalisieren.

Oxidierende Verunreinigungen
Somalutid enthält Methionin (Met) in seiner Sequenz, das anfällig für die Oxidation zu Sulfoxid und dann zu Sulfon ist. In Stabilitätsstudien treten häufig oxidierte Verunreinigungen auf, die sich nach einiger Zeit vermehren. Wir haben einen Vergleich durchgeführt: Unter beschleunigten Bedingungen über einen Monat hinweg kann der Oxidationspeak unkontrolliert auf über 0,3 % ansteigen.

Produkte zum Fettsäureabbau
Die Fettsäureseitenkette (Octadecandisäure) von Somatostatin ist über einen Linker an Lysin gebunden, und diese Modifikation kann während der Synthese oder Lagerung teilweise verloren gehen. Noch problematischer ist, dass die Abspaltung an unterschiedlichen Stellen - zwischen der Fettsäure und dem Linker sowie zwischen dem Linker und dem Peptid - erfolgen kann, was zu unterschiedlichen Verunreinigungen führt. Wir haben für unsere Kunden mehrere mit Fettsäuren verbundene Verunreinigungen synthetisiert, die von der vollständigen Entfernung bis hin zu nur einem kleinen Teil reichen.

PEG-Ketten-bedingte Verunreinigungen
Dies ist die spezifischste Art der Verunreinigung in Somatostatin. Es verfügt über einen PEG-Linker (Polyethylenglykol) und die PEG-Kette kann während der Synthese brechen, sich verkürzen oder polymerisieren, was zu einer Reihe damit verbundener Verunreinigungen führt. Diese Verunreinigungen kommen in gewöhnlichen Peptiden nicht vor, sind aber einzigartig bei Somatostatin und lassen sich in Qualitätsstudien nur schwer untersuchen. Wir haben verschiedene Varianten der PEG-Kettenlöschung, PEG-Kettenverkürzung und PEG-Kettenoxidation entwickelt.

Dimere/Polymere
Zwei oder mehr Somatostatinmoleküle gruppieren sich zu einem Dimer oder höher. Das Molekulargewicht des Dimers ist doppelt so hoch wie das des Hauptpeaks und bei der HPLC handelt es sich häufig um einen breiten Peak. Daher muss es speziell abgetrennt und gereinigt werden, bevor es als Kontrolle verwendet werden kann. Wir haben Dimere hergestellt und es waren mehrere Reinigungsrunden erforderlich, um eine Reinheit von mehr als 95 % zu erreichen.

Desamidierte Verunreinigungen
Asparagin (Asn) und Glutamin (Gln) werden unter sauren oder erhitzten Bedingungen leicht desamidiert, was zu Isomeren führt. Es gibt mehrere Asn und Gln in der Somatostatin-Sequenz, und die Desamidierungsverunreinigung erscheint häufig im forcierten Abbautest, sodass das Kontrollprodukt zum Auffinden der Verunreinigung verwendet werden muss.

Diastereoisomere
Während der Langkettensynthese kann es zu einer Racemisierung einzelner Aminosäuren kommen, was zu Diastereoisomeren führt. Der Gehalt dieser Art von Verunreinigung ist normalerweise nicht hoch, aber Experten werden bei der Deklaration nachfragen und es ist besser, ein Kontrollprodukt zur Bestätigung zu haben.

Viele dieser Verunreinigungen sind nicht käuflich zu erwerben und müssen individuell synthetisiert werden. Wir haben bereits zahlreiche Projekte zur individuellen Anpassung von Somatostatin-Verunreinigungen durchgeführt, die alle oben genannten Kategorien abdecken.

Die Löschung der Peptidserie
We synthesize whatever is missing. For example, the lysine at position 20 is missing, or the amino acid near the fatty acid attachment site is missing. We will synthesize according to your process impurity profile, and the purity is usually >95 %, mit MS- und NMR-Bestätigung. Wir haben eine Reihe von Peptiden mit einem Abstand von 5 Aminosäuren vom N--Terminus zum C--Terminal synthetisiert.

Oxidierende Verunreinigungen
Met in Somatostatin is oxidized to sulfoxide or sulfone, and we can control the oxidation conditions and synthesize the oxidized control product. We can control the oxidation conditions and synthesize the oxidized control product. The purity of the product is >95 %, und wir können das LC-MS-Spektrum zur Verfügung stellen, um den Oxidationsgrad zu bestätigen. Sulfoxid und Sulfon werden durch HPLC getrennt, und wir können beides tun.

Produkte zum Fettsäureabbau
Dies ist der Hauptschwerpunkt der Somalutid-Verunreinigungen. Die Fettsäurekette kann ganz oder teilweise entfernt sein. Wir können eine Reihe von Varianten für verschiedene Abwurfpositionen synthetisieren. In einem der kompliziertesten Projekte, die wir je durchgeführt haben, bat uns der Kunde, eine Verunreinigung mit 6 fehlenden Kohlenstoffatomen in der Fettsäurekette zu synthetisieren, und wir brauchten zwei Monate, um es richtig zu machen.

PEG-Ketten-bedingte Verunreinigungen
Dies ist eine der schwierigsten Verunreinigungen von Somatostatin und gleichzeitig unsere Stärke. Die PEG-Kette kann fehlen, verkürzt, gebrochen oder oxidiert sein und es können verschiedene Varianten entstehen. Wir haben die Verunreinigung mit vollständig fehlender PEG-Kette (d. h. de-PEGyliertes Somatostatin), die Variante mit halbierter PEG-Kettenlänge und das Produkt mit oxidierter PEG-Kette durchgeführt. Dem Kunden wurden diese Kontrollen ausgehändigt und das Spektrum der PEG-bedingten Verunreinigung wurde vollständig ermittelt.

Dimer
Dimere, die durch Vernetzung oder nicht{1}kovalente Wechselwirkungen gebildet werden, können mit verschiedenen Methoden hergestellt und isoliert und gereinigt werden, um hochreine Kontrollen bereitzustellen. Die Reinigung von Dimeren ist aufwändig, aber wir haben die Erfahrung, wie man die Monomere trennt.

Desamidierte Verunreinigungen
Für die Asn- und Gln-Stellen in der Sequenz können wir desamidierte Verunreinigungskontrollen durch erzwungenen Abbau oder gezielte Synthese herstellen. Der Unterschied im Molekulargewicht nach der Desamidierung beträgt nur 1, was durch MS nicht leicht zu unterscheiden ist, daher verwenden wir zur Bestätigung normalerweise NMR oder spezielle chromatographische Bedingungen.

Weitere maßgeschneiderte Verunreinigungen
Wenn Sie bei Ihrer Forschung eine neue unbekannte Verunreinigung finden, können wir Ihnen bei der Analyse der Struktur und der Synthese helfen. Senden Sie uns die Probe, wir führen die LC-MS-Analyse durch, spekulieren über die Struktur, führen dann eine Richtungssynthese durch und vergleichen dann die Retentionszeit und das Massenspektrum, um die Übereinstimmung zu bestätigen. Wir haben diesen Prozess viele Male durchgeführt und die Erfolgsquote ist ziemlich hoch.

Entwicklung und Validierung analytischer Methoden
Beim Einrichten einer HPLC- oder LC{0}}MS-Methode ist eine Verunreinigungskontrolle zur Lokalisierung, Bestimmung der Trennung, Überprüfung des linearen Bereichs und der Wiederfindung erforderlich. Ohne die Kontrolle fehlt der Methodenvalidierung ein Teil. Viele Kunden bitten uns, zunächst einige wichtige Verunreinigungen zu entfernen, um die Methode einzurichten, und den Rest dann langsam nachzuholen.

Heterogene Massenspektrometrie
Bei der Deklaration eines Generikums ist eine umfassende qualitative und quantitative Analyse der Prozessverunreinigungen und Abbauprodukte erforderlich. Ort, Inhalt und Struktur jeder Verunreinigung müssen durch ein Kontrollprodukt bestätigt werden. Wir haben gesehen, dass die Erklärung der Informationen, die zum Nachholen gesendet wurden, in neun von zehn Fällen die Unreinheiten dieses Stücks nicht verstanden hat.

Stabilitätsstudien
Bei Langzeitstabilitäts- und beschleunigten Tests muss ermittelt werden, welche Abbauprodukte dominant sind und wie der Trend beim Inhalt aussieht. Mit einer Verunreinigungskontrolle ist eine genaue Quantifizierung und Überwachung möglich. Ein Kunde untersuchte die Stabilität eines Somatostatin-Präparats und stellte fest, dass unter beschleunigten Bedingungen ein Abbaupeak schnell zunahm. Deshalb analysierten wir ihn mittels MS und synthetisierten ihn, um die Struktur zu bestätigen. Anschließend war der Kunde erleichtert, dies zu melden.

Prüfung der Chargenfreigabe
Nach der Kommerzialisierung muss jede Charge eines Wirkstoffs oder jeder Formulierung auf den betreffenden Stoff getestet werden. Verunreinigungskontrollen sind wesentliche Werkzeuge für Freigabetests.

Informationen zu Generika-Deklarationen
Verunreinigungsstudien sind ein wichtiger Abschnitt der Anmeldeinformationen. Durch die Bereitstellung vollständiger Verunreinigungsprofilierungs- und Kontrolldaten wird das Risiko einer Überprüfungsfreigabe erheblich verringert.

Fall 1: Ein Pharmaunternehmen, Somalutide-Generikaprogramm
Sie entwickeln eine generische Version von Somatostatin und benötigen für die Methodenvalidierung einen vollständigen Satz an Verunreinigungskontrollen. Wir haben 15 Verunreinigungen für sie angepasst: 6 fehlende Peptide, 2 oxidierte Verunreinigungen, 1 Dimer, 2 Fettsäure-Peelingprodukte, 3 mit der PEG-Kette verbundene Verunreinigungen und 1 Desamidierungsverunreinigung. Die Reinheit lag jeweils bei über 95 %, anhand von MS- und NMR-Daten. Der Projektmanager sagte: „Die Verunreinigungen von Somalutid sind komplizierter als bei anderen Peptiden, insbesondere beim PEG. Wir haben nach einer Reihe von Unternehmen gesucht, aber alle sagten, sie könnten es nicht. Aber Sie haben alles geschafft und die Daten waren vollständig, was eine große Hilfe war.“ Anschließend wurde die Validierung ihrer Methode erfolgreich abgeschlossen und sie bereiten nun die Einreichung vor.

Fall 2: Eine CRO, spezielle Studie zu Verunreinigungen in der PEG-Kette
Sie führten ein Qualitätsforschungsprojekt zu Somatostatin durch, das eine umfassende Analyse der mit der PEG-Kette verbundenen Verunreinigungen erforderte. Wir haben die PEG--bedingten Verunreinigungen systematisch synthetisiert: völliges Fehlen der PEG-Kette, Halbierung der PEG-Kettenlänge, Oxidation der PEG-Kettenenden und Bruch der PEG-Kette in zwei Teile. synthetisierte insgesamt 8 PEG--verwandte Verunreinigungen. Der Kunde nutzte diese Kontrollen, um einen vollständigen Satz von Methoden zur Erkennung von PEG-Verunreinigungen zu etablieren, was zum Höhepunkt seiner Einreichungsinformationen wurde.

Fall 3: Stabilitätsstudien, ein Biotechnologieunternehmen
Sie führten eine Stabilitätsstudie der Somatostatin-Formulierung durch und stellten fest, dass der Gehalt eines Abbauprodukts unter beschleunigten Bedingungen schnell zunahm, aber sie wussten nicht, um welches es sich handelte. Wir analysierten die Probe mittels LC-MS, gingen davon aus, dass es sich um eine an einer bestimmten Stelle eine Fettsäure abgebende Verunreinigung handelte, und synthetisierten sie dann gezielt und bestätigten dies durch Vergleich. Mithilfe dieser Kontrolle erstellten sie einen Test und überwachten genau den Trend dieses Abbauprodukts. Später, bei der Einreichung des Berichts, wurde dieser Teil der Daten von den Experten hervorgehoben und aufgrund der soliden Daten wurde keine Entschädigung gewährt.

Somatostatin ist ein sehr beliebtes Produkt, aber die Untersuchung von Verunreinigungen ist eine heikle Aufgabe, insbesondere Verunreinigungen im Zusammenhang mit der PEG-Kette und Fettsäure-Peeling-Produkte, mit denen viele Hersteller nicht umgehen können. Wenn Sie hochwertige Forschung oder generische Entwicklung von Somatostatin betreiben und eine Kontrolle der Verunreinigungen benötigen, können Sie gerne mit uns sprechen. Wir haben viel Arbeit geleistet, wir kennen die Schwierigkeiten und wissen, wie wir sie überwinden können.